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產(chǎn)品詳情
操作說(shuō)明
注意事項(xiàng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品RNA提取液是一種用于細(xì)胞或組織總RNA提取的試劑，利用異硫氰酸胍等物質(zhì)迅速裂解細(xì)胞，使RNA釋放并萃取至苯酚中，同時(shí)內(nèi)含RNase抑制劑，防止RNA降解，保持RNA的完整性。
儲(chǔ)存與運(yùn)輸
冰袋（wet ice）運(yùn)輸；4℃避光保存，有效期12個(gè)月。
組成
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Component |
數(shù)量 |
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RNA提取液 |
100 mL |
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說(shuō)明書(shū) |
1份 |
使用說(shuō)明
自備LF、異丙醇、DEPC水、75%乙醇（DEPC水配制）。
1. 細(xì)胞或組織樣本裂解
貼壁細(xì)胞：去除細(xì)胞培養(yǎng)液，用適量預(yù)冷PBS清洗細(xì)胞，盡量將PBS吸除干凈。按照6孔板每孔加1 mL RNA提取液，12孔板每孔加0.5 mL RNA提取液的用量向孔板中加入RNA提取液，輕輕晃動(dòng)使板底細(xì)胞充分接觸RNA提取液，移液槍吹打細(xì)胞，使細(xì)胞裂解，然后轉(zhuǎn)移至離心管中，室溫靜置5 min。
懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，盡量將上清液吸除干凈，每1-10×106個(gè)細(xì)胞加入1 mLRNA提取液，移液槍吹打數(shù)次使細(xì)胞裂解，室溫靜置5 min。
組織樣本：組織剪切成小塊，放入預(yù)冷的勻漿器內(nèi)，每100 mg組織加入1 mL RNA提取液，勻漿至無(wú)可見(jiàn)組織塊。4℃，12000 g離心10 min使組織碎片分離，轉(zhuǎn)移上清至新的離心管中。
2. RNA抽提：每1 mL RNA提取液加380 μLLF，渦旋混勻或離心管上下顛倒劇烈晃動(dòng)15 s，室溫靜置3 min。
3. 離心：4℃，12000 g離心15 min，小心轉(zhuǎn)移上層無(wú)色水相至新的離心管中，每毫升提取液大約可吸取500-550 μL。
4. 沉淀RNA：向上述收集的水相提取物管中加入550 μL異丙醇，輕輕顛倒混勻數(shù)次，-20℃沉淀15 min。
5. 離心：4℃，12000 g離心10 min，在管底可見(jiàn)白色沉淀即為總RNA，棄上清。
6. 洗滌：加入1 mL 75%乙醇，顛倒混勻。4℃，12000 g離心5 min，棄上清，再高速短暫離心（5000 g離心3-5 s），用微量吸頭小心吸盡液體。
7. RNA溶解：將有RNA沉淀的離心管開(kāi)口靜置3-5 min，待RNA略晾干后，加入20 μL DEPC水使RNA充分溶解，即可用于濃度檢測(cè)及后續(xù)實(shí)驗(yàn)，不能及時(shí)進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)時(shí)需將RNA置于-70℃保存。注意不可讓RNA過(guò)分干燥，否則很難溶解，且會(huì)影響A260/280比值。
注意事項(xiàng)
1. 所有槍頭和離心管均需無(wú)RNA酶污染，可購(gòu)買(mǎi)本公司無(wú)菌無(wú)酶耗材。
2. 本試劑含異硫氰酸胍和重蒸酚，避免接觸皮膚或吸入。
3. 操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，并佩戴一次性手套。
產(chǎn)品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
凡合肥萬(wàn)物生物科技有限公司銷(xiāo)售的產(chǎn)品均有嚴(yán)格的質(zhì)量保證。如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品存在包裝規(guī)格疑問(wèn)，請(qǐng)于收貨之日起七日內(nèi)向我公司總部或當(dāng)?shù)剞k事處提出，并請(qǐng)保證該產(chǎn)品，以備本公司進(jìn)行核對(duì)檢驗(yàn)。如果發(fā)現(xiàn)有質(zhì)量問(wèn)題，請(qǐng)于收貨后一月內(nèi)保留產(chǎn)品50%以上的量，以便本公司回收產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)檢，確認(rèn)產(chǎn)品質(zhì)量。如逾期，則視為已經(jīng)對(duì)本公司產(chǎn)品進(jìn)行驗(yàn)收。 聲明：如發(fā)生產(chǎn)品索賠事宜，本公司僅在產(chǎn)品價(jià)格范圍內(nèi)酌情賠償，恕不接受超出產(chǎn)品價(jià)格范圍之賠償?？蛻?hù)在使用過(guò)程中有任何技術(shù)問(wèn)題可以撥打技術(shù)售后服務(wù)電話(huà)我們隨時(shí)給予解答。
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