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原代細(xì)胞制備與培養(yǎng)
來源：萬物生物 發(fā)布時(shí)間：2021-11-02
原代細(xì)胞制備與培養(yǎng)
將動(dòng)物各種組織從機(jī)體中取出，經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA) 或機(jī)械方法處理，分散成單細(xì)胞，在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖，萬物生物提原代培養(yǎng)服務(wù)供給您高質(zhì)量的原代細(xì)胞株。原代培養(yǎng)的基本過程包括取材、培養(yǎng)材料的制備、接種及培養(yǎng)等步驟。原代培養(yǎng)的方法很多，基本和最常用的是組織塊培養(yǎng)法和分離細(xì)胞法。
基本操作過程
1）、用培養(yǎng)液濕潤所取組織材料，并用鋒利的眼科剪將附在其上的脂肪和結(jié)締組織去除干凈。再用平衡液（PBS）或Hanks液漂洗；用鋒利的眼科彎剪將組織塊剪成小塊；再用PBS或Hanks液漂洗多次，直至液體不渾濁、無油滴、清亮為止。
2）、用濕潤的吸管吸取切碎的組織塊，清清吹到培養(yǎng)瓶皿中，并將其按一定間距均勻放在培養(yǎng)瓶底壁上，量不要過多，要將組織塊切面貼在培養(yǎng)瓶底壁上；
3）、將培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn)，使瓶底朝上，在種植了組織塊一側(cè)的對側(cè)面加足培養(yǎng)液，勿使組織塊與培養(yǎng)液接觸，塞緊瓶塞；
4）、將種植了組織塊的一側(cè)朝上，靜置于37℃培養(yǎng)箱中；待組織塊貼壁1h到3h后翻瓶，使貼壁的組織塊浸沒與培養(yǎng)液中，靜置； 5）、每隔2到3天更換一次培養(yǎng)液，或者根據(jù)培養(yǎng)瓶種顏色的變化確定換液時(shí)間。
服務(wù)特點(diǎn)
1、原代細(xì)胞分離培養(yǎng)與鑒定(鑒定可提供流式細(xì)胞儀檢測、免疫細(xì)胞化學(xué)、RT-PCR 、蛋白免疫印跡等多種方法檢測)。
2、細(xì)胞傳代代數(shù)低(一般4代)，細(xì)胞狀態(tài)好，無污染。
3、根據(jù)您的需要可以提供多種原代培養(yǎng)的細(xì)胞。
需提供的資料
1、詳細(xì)說明進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)的組織，并確定組織是由客戶提供還是本公司提供。
2、盡可能提供該原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件，或者由本公司摸索培養(yǎng)條件。
3、對于一些常見的原代培養(yǎng)組織，因?yàn)楸４孢\(yùn)輸?shù)牟槐憧赡軙档驮囵B(yǎng)的成功率，建議客戶選擇由本公司提供相應(yīng)的組織。
提交的結(jié)果
提供凍存或處于對數(shù)生長期的細(xì)胞株一瓶(細(xì)胞培養(yǎng)條件，圖片)。
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標(biāo)書基金實(shí)驗(yàn)咨詢 表觀遺傳組學(xué)分析
課題實(shí)驗(yàn)結(jié)題指導(dǎo) 細(xì)胞分子功能驗(yàn)證
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